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異養(yǎng)細(xì)菌生長效率(BGE),即消耗的碳和產(chǎn)生的細(xì)菌生物量之間的比率,是理解水生生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)物質(zhì)流動(dòng)的關(guān)鍵因素。 通常用于估計(jì)細(xì)菌呼吸的方法需要長時(shí)間培養(yǎng)(24至36小時(shí)),以測量氧減少的非線性模式可能會(huì)影響B(tài)GE計(jì)算的顯著速率。 這些呼吸估計(jì)值通常與通過較短培養(yǎng)時(shí)間的放射性示蹤劑摻入測定的細(xì)菌產(chǎn)率進(jìn)行比較。 本研究的目的是改進(jìn)細(xì)菌呼吸的測定,以更好地估計(jì)BGE。 為此,我們?cè)跓o捕食者(0.6μm過濾)的海水樣品中使用了氧微探針,并平行測定了細(xì)菌豐度。 氧氣微探針的使用使我們能夠在培養(yǎng)過程中連續(xù)監(jiān)測氧氣濃度。 因此,只要觀察到氧氣顯著減少,就可以調(diào)整培養(yǎng)時(shí)間。 在最具生產(chǎn)力的地點(diǎn),呼吸從孵化開始就可測量,并隨時(shí)間變化。 相比之下,在寡養(yǎng)場所,呼吸通常僅在5至10小時(shí)的滯后期后才可檢測到,并在此后保持不變。 根據(jù)呼吸測量期間觀察到的細(xì)菌豐度變化計(jì)算BGE。 這樣,這兩個(gè)過程都是在類似的培養(yǎng)條件下確定的。 相比之下,使用放射性示蹤劑衍生的細(xì)菌生產(chǎn)系統(tǒng)性地導(dǎo)致低估BGE。 通常用于估計(jì)細(xì)菌呼吸的方法需要長時(shí)間培養(yǎng)(24至36小時(shí)),以測量氧減少的非線性模式可能會(huì)影響B(tài)GE計(jì)算的顯著速率。這些呼吸估計(jì)值通常與通過較短培養(yǎng)時(shí)間的放射性示蹤劑摻入測定的細(xì)菌產(chǎn)率進(jìn)行比較。本研究的目的是改進(jìn)細(xì)菌呼吸的測定,以更好地估計(jì)BGE。為此,我們?cè)跓o捕食者(0.6μm過濾)的海水樣品中使用了氧微探針,并平行測定了細(xì)菌豐度。氧氣微探針的使用使我們能夠在培養(yǎng)過程中連續(xù)監(jiān)測氧氣濃度。因此,只要觀察到氧氣顯著減少,就可以調(diào)整培養(yǎng)時(shí)間。在最具生產(chǎn)力的地點(diǎn),呼吸從孵化開始就可測量,并隨時(shí)間變化。相比之下,在寡養(yǎng)場所,呼吸通常僅在5至10小時(shí)的滯后期后才可檢測到,并在此后保持不變。根據(jù)呼吸測量期間觀察到的細(xì)菌豐度變化計(jì)算BGE。這樣,這兩個(gè)過程都是在類似的培養(yǎng)條件下確定的。相比之下,使用放射性示蹤劑衍生的細(xì)菌生產(chǎn)系統(tǒng)性地導(dǎo)致低估BGE。
異養(yǎng)細(xì)菌在水生生態(tài)系統(tǒng)中占主導(dǎo)地位。 就其數(shù)量豐度而言,它們是生物圈中有機(jī)物質(zhì)轉(zhuǎn)化和礦化過程中最重要的生物成分(Cho和Azam,1988年)。 眾所周知,它們至少處理通過海洋浮游生物網(wǎng)絡(luò)的總碳通量的一半(Fuhrman 1992)。 異養(yǎng)細(xì)菌以兩種主要方式促進(jìn)營養(yǎng)物和碳的循環(huán):通過產(chǎn)生新的細(xì)菌生物量(二次生產(chǎn))和通過重新礦化有機(jī)碳和營養(yǎng)物(del Giorgio和Cole,1998年)。 了解水生生態(tài)系統(tǒng)中浮游細(xì)菌的這種雙重特性是當(dāng)代微生物生態(tài)學(xué)的一個(gè)中心范例(Pomeroy等人,1991年;Ducklow和Carlson 1992年)。
因此,了解BGE(消耗的碳與產(chǎn)生的細(xì)菌生物量之間的比率)是評(píng)估水生生態(tài)系統(tǒng)碳收支的先決條件。
許多作者明確強(qiáng)調(diào)BGE在時(shí)間(Lemée等人,2002年)和空間(Griffith等人,1990年)上的變化。 事實(shí)上,BGE取決于多種因素,如有機(jī)質(zhì)和礦物質(zhì)的數(shù)量和質(zhì)量。 更準(zhǔn)確地說,BGE取決于底物C/N比(Kroer 1993;Jorgensen等人1994)和底物分子量(Tulonen等人1992;Amon和Benner 1996)。 BGE似乎也與無機(jī)營養(yǎng)物的可用性(Tulonen等人1992年;Krore 1993年;Zweifel等人1993年)、不穩(wěn)定碳池的濃度(Barillier和Garnier 1993年;Middelboe和Sondergaard 1993年)以及浮游細(xì)菌的生長率(Middelboe等人1992年)呈正相關(guān)。 據(jù)報(bào)道,BGE與溫度呈負(fù)相關(guān)(Bjornen 1986,Daneri et al.1994),但其他結(jié)果不支持這一假設(shè)(Barillier和Garnier 1993;Kroer 1993)。 因此,許多過程可能控制BGE,這些過程本身可以回答不同的控制因素(del Giorgio和Cole,1998)。 任何一個(gè)系統(tǒng)中BGE的巨大可變性表明,目前,在研究新生態(tài)系統(tǒng)時(shí),可能無法從文獻(xiàn)數(shù)據(jù)中推斷BGE值。
BGE可以通過兩種不同的方式確定。 第一次估算是基于放射性示蹤劑使用簡單的有機(jī)碳源(Hobbie和Crawford,1969年)。 盡管這種方法具有優(yōu)勢(高靈敏度、培養(yǎng)時(shí)間短、無解偶聯(lián)),但使用簡單化合物(通常不穩(wěn)定)不能代表細(xì)菌使用的底物的多樣性(del Giorgio和Cole,1998)。 因此,該方法存在高估BGE的主要缺點(diǎn),根據(jù)使用的基板和測量條件,BGE值可達(dá)到97%(Bjornen 1986)。 其他方法需要解偶聯(lián)(例如,細(xì)菌必須與其他浮游生物成分物理分離),以便專門確定異養(yǎng)細(xì)菌的活動(dòng)。 這通常通過在2至0.6μm范圍內(nèi)進(jìn)行過濾來嘗試。 這些方法包括在原位測量可用有機(jī)物的細(xì)菌消耗量,并將其與細(xì)菌產(chǎn)量估計(jì)器進(jìn)行比較。 細(xì)菌產(chǎn)量通常通過放射性示蹤劑摻入(3H-胸腺嘧啶核苷或亮氨酸)來確定,但也可以通過細(xì)菌豐度的變化來估計(jì)。 為了測量有機(jī)物的細(xì)菌消耗量,提出了不同的指標(biāo):溶解有機(jī)碳(DOC)消耗量(Middelboe et al.1992;Kroer 1993;Zweifel et al.1993;Carlson and Ducklow 1996)、O2消耗量(Pomeroy et al.1994;Pomeroy et al.1995)或CO2產(chǎn)生量(Bjornen 1986)。 然而,這些方法通常需要較長的培養(yǎng)時(shí)間(24、36或72小時(shí))來測量DOC、O2或CO2的顯著變化。 因此,瓶效應(yīng)可能導(dǎo)致細(xì)菌群落組成的變化(Masana等人,2001年;Gattuso等人,2002年)和/或營養(yǎng)資源的枯竭(Pradeep Ram等人,2003年)。 因此,結(jié)果可能不能代表最初的細(xì)菌組合。 因此,重要的是使用一種方法來估算BGE,該方法允許在小于24小時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)連續(xù)測量有機(jī)物的消耗量。
可使用不同的技術(shù)對(duì)氧氣進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測,例如在過去幾年中開發(fā)的帶有氧氣宏觀探針的呼吸計(jì)(Langdon 1993;Taylor等人,2003)。 最近,一種基于氧的質(zhì)譜測定的半連續(xù)技術(shù)(Kana 1994)被用于測量河口水域的細(xì)菌呼吸(Bouvier和del Giorgio 2002;del Giorgio和Bouvier 2002)。 在這項(xiàng)研究中,我們提出了一種利用氧微探針估計(jì)細(xì)菌呼吸的方法,目的是確定細(xì)菌的生長效率。 氧微探針已經(jīng)在底棲系統(tǒng)中使用了20多年,但這項(xiàng)技術(shù)尚未應(yīng)用于浮游生物系統(tǒng)。 我們首先描述了這種方法的優(yōu)點(diǎn),它允許連續(xù)監(jiān)測氧氣濃度。 然后,我們利用這一程序估算了新喀里多尼亞西南瀉湖對(duì)比營養(yǎng)狀況下的BGE。
使用氧微電極來研究細(xì)菌的呼吸作用以確定浮游細(xì)菌的生長速率——摘要
使用氧微電極來研究細(xì)菌的呼吸作用以確定浮游細(xì)菌的生長速率——材料和程序