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結(jié)果
葡萄漿果的內(nèi)部氧分布
在霞多麗中,[O 2]從表皮向中果皮內(nèi)部減少,在2.2-4毫米深度處達(dá)到低濃度(圖1)。該的最小[O 2深度范圍內(nèi)]為5.5±5.5μmol l–1。然而,隨著進(jìn)一步向漿果中心軸滲透,[O 2]增加并在7毫米深度處達(dá)到最大值(圖1)。為了測試[O 2]分布是否受到引入的O影響,2的通過滲透部位N 2在測量過程中將氣體輕輕施加到傳感器的入口點(diǎn)。的[O 2對照和氮處理漿果]分布相似(圖1),表明通過滲透部位的泄漏不會影響記錄的分布。
成熟過程中內(nèi)部氧譜的變化和細(xì)胞死亡的進(jìn)展
為了揭示CD的進(jìn)展與漿果內(nèi)缺氧之間是否存在聯(lián)系,我們使用FDA染色確定了CD,并記錄[O 2了同一天采樣的漿果的]剖面。類似的[O 2 Chardonnay和Ruby Seedless(中觀察到]分布圖2A、C)以及Shiraz在前1.5毫米(圖2E),但,[O 2隨著成熟的進(jìn)行]在整個(gè)果皮上下降得更陡峭在所有品種中,導(dǎo)致整個(gè)[O總體較低2漿果的]。這表現(xiàn)為最低[O低得多2最后成熟階段采樣的]:霞多麗0μmol l–1、紅寶石無籽14.9±8.86μmol l–1和設(shè)拉子0μmol l–1。由于無法在設(shè)拉子漿果中看到種子,因此微型氧傳感器無法移入漿果中超過約1.6毫米,而不會危及傳感器的完整性(圖2E)。然而,很明顯,[O 2]急劇下降到1毫米(圖2E)。
圖2
[O2]霞多麗、紅寶石無核和設(shè)拉子漿果(A、C、E)在不同成熟階段的[O2]剖面圖以及每個(gè)品種(B、D、F)果皮中活組織(LT)的相應(yīng)示例。(A)霞多麗漿果在2015-2016季節(jié)的DAA為87、104和136時(shí)采樣。雙向方差分析(重復(fù))顯示,深度占總變異的46.7%(P<0.0001),時(shí)間占總變異的29.9%(P<0.0001),交互作用占總變異的8.0%(P=0.058))。水平虛線表示室溫下Millipore水的近似O2飽和值,與測量時(shí)的漿果相同。(B)用FDA染色的內(nèi)側(cè)縱向切片(霞多麗),突出了不同成熟階段的LT差異(對應(yīng)于A)。(C)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的Ruby無核漿果的[O2]配置文件。雙向方差分析(重復(fù))顯示深度占總變異的85.2%(P<0.0001),時(shí)間占總變異的1.2%(P=0.0025),交互作用占總變異的3.7%(P=0.048))。(D)Ruby Seedless的LT在兩個(gè)相應(yīng)的采樣日接近100%。(E)2014-2015季節(jié)在85和114 DAA上采樣的設(shè)拉子漿果的[O2]配置文件。插圖顯示了1.5毫米的輪廓細(xì)節(jié)。雙向方差分析(重復(fù))顯示,深度占總變異的40.9%(P=0.0005),時(shí)間占總變異的19.6%(P<0.0001),交互作用占總變異的6.4%(P=0.43))。(F)設(shè)拉子的LT。數(shù)據(jù)是平均值±SE,對于(A)、(C)和(E),n=3。
[O 2]霞多麗、紅寶石無核和設(shè)拉子漿果(A、C、E)在不同成熟階段的概況以及每個(gè)品種(B、D、F)果皮中活組織(LT)的相應(yīng)示例。(A)霞多麗漿果在2015-2016季節(jié)的DAA為87、104和136時(shí)采樣。雙向方差分析(重復(fù))顯示,深度占總變異的46.7%(P<0.0001),時(shí)間占總變異的29.9%(P<0.0001),交互作用占總變異的8.0%(P=0.058)。水平虛線表示的近似O 2室溫下Millipore水飽和值,與測量時(shí)的漿果相同。(B)用FDA染色的內(nèi)側(cè)縱向切片(霞多麗),突出了不同成熟階段的LT差異(對應(yīng)于A)。(C)[O 2 2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的紅寶石無核漿果的]概況。雙向方差分析(重復(fù))顯示深度占總變異的85.2%(P<0.0001),時(shí)間占總變異的1.2%(P=0.0025),交互作用占總變異的3.7%(P=0.048)。(D)Ruby Seedless的LT在兩個(gè)相應(yīng)的采樣日接近100%。(E)[O 2 2014-2015季節(jié)在85和114 DAA上采樣的設(shè)拉子漿果的]概況。插圖顯示了1.5毫米的輪廓細(xì)節(jié)。雙向方差分析(重復(fù))顯示深度占總變異的40.9%(P=0.0005),時(shí)間占總變異的19.6%(P<0.0001),交互作用占總變異的6.4%(P=0.43)。(F)設(shè)拉子的LT。數(shù)據(jù)是平均值±SE,,n對于(A)、(C)和(E)=3。
[O2]霞多麗、紅寶石無核和設(shè)拉子漿果(A、C、E)在不同成熟階段的[O2]剖面圖以及每個(gè)品種(B、D、F)果皮中活組織(LT)的相應(yīng)示例。(A)霞多麗漿果在2015-2016季節(jié)的DAA為87、104和136時(shí)采樣。雙向方差分析(重復(fù))顯示,深度占總變異的46.7%(P<0.0001),時(shí)間占總變異的29.9%(P<0.0001),交互作用占總變異的8.0%(P=0.058))。水平虛線表示室溫下Millipore水的近似O2飽和值,與測量時(shí)的漿果相同。(B)用FDA染色的內(nèi)側(cè)縱向切片(霞多麗),突出了不同成熟階段的LT差異(對應(yīng)于A)。(C)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的Ruby無核漿果的[O2]配置文件。雙向方差分析(重復(fù))顯示深度占總變異的85.2%(P<0.0001),時(shí)間占總變異的1.2%(P=0.0025),交互作用占總變異的3.7%(P=0.048))。(D)Ruby Seedless的LT在兩個(gè)相應(yīng)的采樣日接近100%。(E)2014-2015季節(jié)在85和114 DAA上采樣的設(shè)拉子漿果的[O2]配置文件。插圖顯示了1.5毫米的輪廓細(xì)節(jié)。雙向方差分析(重復(fù))顯示,深度占總變異的40.9%(P=0.0005),時(shí)間占總變異的19.6%(P<0.0001),交互作用占總變異的6.4%(P=0.43))。(F)設(shè)拉子的LT。數(shù)據(jù)是平均值±SE,對于(A)、(C)和(E),n=3。
活力染色(圖2B、F)表明,對于霞多麗和設(shè)拉子,CD隨著TSS的積累而隨時(shí)間增加,并且主要發(fā)生在中果皮的中部,對應(yīng)于[O的最小值2]中。此外,霞多麗漿果赤道處熒光信號強(qiáng)度的變化顯示出與漿果內(nèi)部[O相似的趨勢2](圖3A 3A),表明細(xì)胞活力與內(nèi)部[O)之間存在相關(guān)性2](圖。3B)。另一方面,當(dāng)TSS為20.7°Brix時(shí),Ruby Seedless漿果在132 DAA下保持接近100%的細(xì)胞活力(圖2D)。雖然類似形狀的[O 2與霞多麗漿果的中果皮相比,在Ruby Seedless漿果的中果皮中觀察到]分布(圖圖2C),但[O 2]沒有達(dá)到零。
圖3
活組織熒光信號與[O2]分布之間的相關(guān)性。來自霞多麗(A)和Ruby Seedless(C)赤道半徑上的FDA染色(高值=較高的活組織)的熒光信號[相對灰度(%最大值)]。87和104 DAA上的霞多麗(B)和91和132 DAA(D)上的Ruby Seedless中相應(yīng)深度(對數(shù)刻度)的熒光信號強(qiáng)度和[O2]之間的相關(guān)性(戴明回歸)([O2]分布如圖2所示)。1)。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。
活組織熒光信號與[O之間的相關(guān)性2]分布。來自霞多麗(A)和Ruby Seedless(C)赤道半徑上的FDA染色(高值=較高的活組織)的熒光信號[相對灰度(%最大值)]。熒光信號強(qiáng)度與[O之間的相關(guān)性(戴明回歸)2 87和104 DAA上的霞多麗(B)和91和132 DAA上的Ruby Seedless(D)中相應(yīng)深度(對數(shù)刻度)處的]([O 2]分布如圖所示)圖1)。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。
活組織熒光信號與[O2]分布之間的相關(guān)性。來自霞多麗(A)和Ruby Seedless(C)赤道半徑上的FDA染色(高值=較高的活組織)的熒光信號[相對灰度(%最大值)]。87和104 DAA上的霞多麗(B)和91和132 DAA(D)上的Ruby Seedless中相應(yīng)深度(對數(shù)刻度)的熒光信號強(qiáng)度和[O2]之間的相關(guān)性(戴明回歸)([O2]分布如圖2所示)。1)。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。
盡管[O減少2在成熟過程中整個(gè)中果皮的],對于霞多麗和紅寶石無核漿果,[O 2]開始隨著深度從~4.2毫米增加,并在霞多麗中達(dá)到最大~6.2毫米,在較大的中達(dá)到8.2毫米紅寶石無核漿果(圖2A、C)。相對于每個(gè)漿果復(fù)制品(的直徑標(biāo)準(zhǔn)化傳感器的位置圖4 4)表明,)的,[O 2在霞多麗(所有采樣時(shí)間]在中央維管束區(qū)域達(dá)到峰值圖4A)和Ruby Seedless(圖。4B)。
圖4
單個(gè)漿果[O2]配置文件歸一化為漿果半徑。(A)2015-2016季節(jié)在87、104和136 DAA采樣的霞多麗漿果的[O2]分布(平均數(shù)據(jù)如圖2所示)。(B)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的單個(gè)Ruby無核漿果的[O2]配置文件。
單個(gè)漿果[O 2]配置文件歸一化到漿果半徑。(A)[O 2 2015-2016季節(jié)在87、104和136 DAA采樣的霞多麗漿果的]分布(平均數(shù)據(jù)如圖所示圖2)。(B)[O 2 2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的單個(gè)紅寶石無核漿果的]概況。
單個(gè)漿果[O2]配置文件歸一化為漿果半徑。(A)2015-2016季節(jié)在87、104和136 DAA采樣的霞多麗漿果的[O2]分布(平均數(shù)據(jù)如圖2所示)。(B)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的單個(gè)Ruby無核漿果的[O2]配置文件。
葡萄漿果內(nèi)氧氣的消耗和供應(yīng)途徑
考慮到CD和[O之間的聯(lián)系2](圖3),以及發(fā)育良好的Ruby Seedless漿果中缺乏CD(圖2D),我們研究了種子對霞多麗漿果呼吸需求的貢獻(xiàn).種子鮮重在糖分積累和皮膚著色開始時(shí)達(dá)到峰值,此階段稱為veraison(Ristic和Iland,2005年多麗達(dá)),這里的霞到~63 DAA。按每克鮮重計(jì)算,此階段的種子呼吸比整個(gè)漿果的呼吸高5倍。與63 DAA相比,122 DAA的漿果呼吸減少了約三分之一(圖5A);然而,種子呼吸減少了40倍(圖5B)。漿果質(zhì)量幾乎翻了一番,從63 DAA時(shí)的7.2±0.5 g到122 DAA時(shí)的13.9±1.4 g;因此,在每個(gè)漿果的基礎(chǔ)上,呼吸速率從63 DAA增加到122 DAA,增加了約18%(圖5C)。漿果中種子總數(shù)的貢獻(xiàn)占veraison漿果呼吸需求的一半以上。這在122 DAA時(shí)下降到一個(gè)微不足道的比例(圖5C)。
圖5
2015-2016季節(jié)在63和122 DAA下的霞多麗漿果和種子呼吸(25°C)。漿果(A)和種子(B)以每克鮮重為基礎(chǔ)的呼吸作用。(C)基于每個(gè)漿果(包括種子)、總種子基礎(chǔ)和單種子基礎(chǔ)的呼吸速率比較。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。所有比率在63和122 DAA之間都不同(t檢驗(yàn),P<0.05)。
2015-2016季節(jié)在63和122 DAA下的霞多麗漿果和種子呼吸(25°C)。漿果(A)和種子(B)以每克鮮重為基礎(chǔ)的呼吸作用。(C)基于每個(gè)漿果(包括種子)、總種子基礎(chǔ)和單種子基礎(chǔ)的呼吸速率比較。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。所有比率在63和122 DAA之間都不同(t檢驗(yàn),P<0.05)。
2015-2016季節(jié)在63和122 DAA下的霞多麗漿果和種子呼吸(25°C)。漿果(A)和種子(B)以每克鮮重為基礎(chǔ)的呼吸作用。(C)基于每個(gè)漿果(包括種子)、總種子基礎(chǔ)和單種子基礎(chǔ)的呼吸速率比較。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。所有比率在63和122 DAA之間都不同(t檢驗(yàn),P<0.05)。
擴(kuò)散到漿果中的阻力差異可能會影響[O 2]分布?;üFた卓赡芴峁㎡的途徑,2進(jìn)入這可以解釋朝向漿果中心軸的較高濃度。Chardonnay(之間的皮孔形態(tài)存在明顯差異圖6A)和Shiraz漿果(圖6B)。與設(shè)拉子漿果相比,霞多麗花梗上的單個(gè)皮孔更大,總表面積占花梗表面積的比例也大10倍(圖6C)。
圖6。
霞多麗(A)和設(shè)拉子(B)漿果花梗之間皮孔形態(tài)和相對皮孔面積的差異。(C)相對于霞多麗和設(shè)拉子漿果(室內(nèi)種植,2015年)的花梗表面積,使用ImageJ估計(jì)的扁豆面積。(A)和(B)中的比例尺=1 mm。(C)中的數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=5,*顯著不同(t檢驗(yàn),P<0.05)。
霞多麗(A)和設(shè)拉子(B)漿果花梗之間皮孔形態(tài)和相對皮孔面積的差異。(C)相對于霞多麗和設(shè)拉子漿果(室內(nèi)種植,2015年)的花梗表面積,使用ImageJ估計(jì)的扁豆面積。(A)和(B)中的比例尺=1 mm。(C)中的數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=5,*顯著不同(t檢驗(yàn),P<0.05)。
霞多麗(A)和設(shè)拉子(B)漿果花梗之間皮孔形態(tài)和相對皮孔面積的差異。(C)相對于霞多麗和設(shè)拉子漿果(室內(nèi)種植,2015年)的花梗表面積,使用ImageJ估計(jì)的扁豆面積。(A)和(B)中的比例尺=1 mm。(C)中的數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=5,*顯著不同(t檢驗(yàn),P<0.05)。
為了確定花梗上的皮孔是否可以作為漿果氣體交換的場所,對相同批次的漿果進(jìn)行呼吸測量,這些漿果有或沒有用硅脂覆蓋的梗以阻礙氣體交換。這在20°C和40°C下進(jìn)行了檢查,因?yàn)閷呼吸需求2的隨溫度增加(Hertog等人,1998年)。圖7A顯示,在40°C下用硅脂覆蓋漿果梗(和皮孔)可降低設(shè)拉子和霞多麗漿果在40°C下的漿果呼吸,但對20°C下的呼吸沒有影響。呼吸的溫度依賴性在霞多麗和西拉更詳細(xì)地進(jìn)行了檢查,既產(chǎn)生相似的活化能和Q 10(補(bǔ)充圖S1,S2在JXB在線)沒有在兩天每個(gè)品種采樣漿果之間不同。覆蓋花梗的漿果的表觀呼吸減少并不是由于花梗呼吸的消除,因?yàn)?0°C時(shí)的花梗呼吸速率是總漿果呼吸的一小部分(圖7B)并且沒有解釋減少當(dāng)覆蓋花梗時(shí)觀察到(圖7A),其中花梗覆蓋的設(shè)拉子和霞多麗在40°C下的呼吸減少為839.7±101.8 nmol h–1和1233.9±229.4 nmol h–1每個(gè)漿果。
圖7
花梗在氧擴(kuò)散中作為溫度的函數(shù)的作用。(A)霞多麗(86 DAA)和設(shè)拉子(77 DAA)漿果(每個(gè)漿果)在20°C和40°C下的呼吸,并附有花梗(2016-2017季節(jié))。硅脂覆蓋花梗上的皮孔(覆蓋漿果)。在20°C下,兩個(gè)品種的對照和花梗覆蓋的漿果之間的表觀漿果呼吸沒有顯著差異。不同的小寫字母表示每個(gè)品種在40°C處理之間的顯著差異(雙向方差分析,P<0.0001)。Shiraz和Chardonnay在40°C時(shí)每個(gè)漿果的呼吸作用分別降低了839.7±101.8 nmol h-1和1377.3±161.3 nmol h-1(降低了26%和39%)。(B)整個(gè)漿果的呼吸速率,包括附著的花梗和霞多麗在40°C下的分離花梗的呼吸?;üU颊麄€(gè)漿果呼吸率的9%。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。
花梗在氧擴(kuò)散中作為溫度的函數(shù)的作用。(A)霞多麗(86 DAA)和設(shè)拉子(77 DAA)漿果(每個(gè)漿果)在20°C和40°C下的呼吸作用,并附有花梗(2016-2017季節(jié))。硅脂覆蓋花梗上的皮孔(覆蓋漿果)。在20°C下,兩個(gè)品種的對照和花梗覆蓋的漿果之間的表觀漿果呼吸沒有顯著差異。不同的小寫字母表示每個(gè)品種在40°C處理之間的顯著差異(雙向方差分析,P<0.0001)。Shiraz和Chardonnay降低了839.7±101.8 nmol h–1和1377.3±161.3 nmol h–1在40°C下的呼吸作用中,每個(gè)漿果的呼吸作用分別(降低了26%和39%)。(B)整個(gè)漿果的呼吸速率,包括附著的花梗和霞多麗在40°C下的分離花梗的呼吸?;üU颊麄€(gè)漿果呼吸率的9%。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。
花梗在氧擴(kuò)散中作為溫度的函數(shù)的作用。(A)霞多麗(86 DAA)和設(shè)拉子(77 DAA)漿果(每個(gè)漿果)在20°C和40°C下的呼吸,并附有花梗(2016-2017季節(jié))。硅脂覆蓋花梗上的皮孔(覆蓋漿果)。在20°C下,兩個(gè)品種的對照和花梗覆蓋的漿果之間的表觀漿果呼吸沒有顯著差異。不同的小寫字母表示每個(gè)品種在40°C處理之間的顯著差異(雙向方差分析,P<0.0001)。Shiraz和Chardonnay在40°C時(shí)每個(gè)漿果的呼吸作用分別降低了839.7±101.8 nmol h-1和1377.3±161.3 nmol h-1(降低了26%和39%)。(B)整個(gè)漿果的呼吸速率,包括附著的花梗和霞多麗在40°C下的分離花梗的呼吸。花梗占整個(gè)漿果呼吸率的9%。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3。
[O快速減少2當(dāng)N時(shí),在距離花梗約2毫米和靠近紅寶石無核漿果的中心軸處觀察到]的2流在花梗上被激活(圖8)。
圖8
花梗在氣體擴(kuò)散到Ruby Seedless葡萄中的作用(2016-2017季節(jié)為132 DAA)。三個(gè)單獨(dú)漿果的[O2]作為時(shí)間的函數(shù),傳感器插入大約Ruby Seedless的中心軸,距花梗約2毫米。虛線表示在花梗上開始外部N2氣體輸送。不同的符號表示不同的漿果。插圖:在測量[O2]的同時(shí)在漿果花梗上施加N2氣體的實(shí)驗(yàn)裝置。
花梗在氣體擴(kuò)散到Ruby Seedless葡萄中的作用(2016-2017季節(jié)為132 DAA)。[O 2三個(gè)單獨(dú)漿果的]作為時(shí)間的函數(shù),傳感器插入大約距離花梗約2 mm的Ruby Seedless的中心軸。虛線表示開始外部N 2在花梗上氣體輸送。不同的符號表示不同的漿果。插圖:施加N實(shí)驗(yàn)裝置2在測量[O同時(shí)在漿果花梗上氣體的2]的。
花梗在氣體擴(kuò)散到Ruby Seedless葡萄中的作用(2016-2017季節(jié)為132 DAA)。三個(gè)單獨(dú)漿果的[O2]作為時(shí)間的函數(shù),傳感器插入大約Ruby Seedless的中心軸,距花梗約2毫米。虛線表示在花梗上開始外部N2氣體輸送。不同的符號表示不同的漿果。插圖:在測量[O2]的同時(shí)在漿果花梗上施加N2氣體的實(shí)驗(yàn)裝置。
隨后使用生長箱培養(yǎng)的霞多麗葡萄藤進(jìn)行了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn),以測試覆蓋附著在葡萄藤上的漿果的花梗皮孔是否會影響內(nèi)部[O 2]分布。用硅脂覆蓋漿果梗三天后[O減少,2,中央血管區(qū)域的]并保持在0μmol l附近–1在隨后的15天中(圖9A)。對于對照漿果,,[O的最大值2在所有天的測量中]在中心軸處很明顯。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,TSS的濃度隨著時(shí)間的推移而增加,并且對于皮孔覆蓋的漿果來說更高(圖9B)。糖/漿果不受覆蓋皮孔的影響(圖9C)。在覆蓋花梗皮孔后第12天和第20天測量漿果的乙醇濃度。與對照漿果相比,這些漿果顯示出更高的乙醇含量(圖9D),這與缺氧漿果內(nèi)更多的發(fā)酵一致。通過在覆蓋皮孔10天后限制氧擴(kuò)散,CD顯著增加(圖9E),這也從跨漿果的橫斷面檢查中明顯看出(圖9F)。
圖9
在成熟過程中用硅脂覆蓋漿果花梗對完整霞多麗簇的影響(2017年種植室,空心方塊=對照,實(shí)心圓圈=覆蓋)。(A)[O2]在漿果的近似中心軸上作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)。雙向方差分析顯示覆蓋花梗減少了[O2](P<0.0001)。(B)覆蓋花梗后漿果的總可溶性固體(TSS)濃度隨時(shí)間的變化。與對照漿果相比,花梗覆蓋的漿果在實(shí)驗(yàn)過程中顯示出顯著更高的TSS(雙向方差分析P=0.003;擬合為二階多項(xiàng)式,實(shí)線=對照,虛線=覆蓋)。(C)作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)的每個(gè)漿果的糖分。糖/漿果處理之間沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異(組合擬合是二階多項(xiàng)式,實(shí)線)。(D)12天和20天后漿果的乙醇濃度,有(填充)和沒有(開放)硅脂覆蓋花梗。雙向ANOVA(Tukey多重比較檢驗(yàn))在覆蓋后20 d顯示出顯著差異(P=0.036)。(E)作為時(shí)間函數(shù)的活組織百分比。覆蓋漿果的擬合線(虛線)的斜率不為零(P=0.008),并且不同于未覆蓋漿果的擬合線(實(shí)線)的斜率(P=0.006)。(F)赤道半徑上的熒光信號(FDA染色,相對于最大值,高值=較高的活組織)在覆蓋后14天和18天針對漿果直徑的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)都顯示了局部加權(quán)散點(diǎn)圖平滑擬合(LOWESS)。覆蓋(虛線)與對照(實(shí)線)在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著不同(雙向方差分析,P<0.001)。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3,除了(F)未顯示SE。
在成熟過程中用硅脂覆蓋漿果花梗對完整霞多麗簇的影響(2017年種植室,空心方塊=對照,實(shí)心圓圈=覆蓋)。(A)[O 2]在漿果的近似中心軸上作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)。雙向方差分析顯示覆蓋花梗減少[O 2](P<0.0001)。(B)覆蓋花梗后漿果的總可溶性固體(TSS)濃度隨時(shí)間的變化。與對照漿果相比,花梗覆蓋的漿果在實(shí)驗(yàn)過程中顯示出顯著更高的TSS(雙向方差分析P=0.003;擬合為二階多項(xiàng)式,實(shí)線=對照,虛線=覆蓋)。(C)作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)的每個(gè)漿果的糖分。糖/漿果處理之間沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異(組合擬合是二階多項(xiàng)式,實(shí)線)。(D)12天和20天后漿果的乙醇濃度,有(填充)和沒有(開放)硅脂覆蓋花梗。雙向方差分析(Tukey多重比較檢驗(yàn))在覆蓋后20 d顯示出顯著差異(P=0.036)。(E)作為時(shí)間函數(shù)的活組織百分比。覆蓋漿果的擬合線(虛線)非零(P的斜率=0.008)并且不同于未覆蓋漿果的擬合線(實(shí)線)的斜率(P=0.006)。(F)赤道半徑上的熒光信號(FDA染色,相對于最大值,高值=較高的活組織)在覆蓋后14天和18天針對漿果直徑的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)都顯示了局部加權(quán)散點(diǎn)圖平滑擬合(LOWESS)。覆蓋(虛線)與對照(實(shí)線)在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著不同(雙向方差分析,P<0.001)。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3,除了(F)未顯示SE。
在成熟過程中用硅脂覆蓋漿果花梗對完整霞多麗簇的影響(2017年種植室,空心方塊=對照,實(shí)心圓圈=覆蓋)。(A)[O2]在漿果的近似中心軸上作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)。雙向方差分析顯示覆蓋花梗減少了[O2](P<0.0001)。(B)覆蓋花梗后漿果的總可溶性固體(TSS)濃度隨時(shí)間的變化。與對照漿果相比,花梗覆蓋的漿果在實(shí)驗(yàn)過程中顯示出顯著更高的TSS(雙向方差分析P=0.003;擬合為二階多項(xiàng)式,實(shí)線=對照,虛線=覆蓋)。(C)作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)的每個(gè)漿果的糖分。糖/漿果處理之間沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異(組合擬合是二階多項(xiàng)式,實(shí)線)。(D)12天和20天后漿果的乙醇濃度,有(填充)和沒有(開放)硅脂覆蓋花梗。雙向ANOVA(Tukey多重比較檢驗(yàn))在覆蓋后20 d顯示出顯著差異(P=0.036)。(E)作為時(shí)間函數(shù)的活組織百分比。覆蓋漿果的擬合線(虛線)的斜率不為零(P=0.008),并且不同于未覆蓋漿果的擬合線(實(shí)線)的斜率(P=0.006)。(F)赤道半徑上的熒光信號(FDA染色,相對于最大值,高值=較高的活組織)在覆蓋后14天和18天針對漿果直徑的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)都顯示了局部加權(quán)散點(diǎn)圖平滑擬合(LOWESS)。覆蓋(虛線)與對照(實(shí)線)在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著不同(雙向方差分析,P<0.001)。數(shù)據(jù)是平均值±SE,n=3,除了(F)未顯示SE。
顯微CT顯示的葡萄漿果內(nèi)的空氣空間
使用微CT,霞多麗漿果在成熟過程中的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的內(nèi)部氣隙,其中漿果內(nèi)氣隙的總體積大于500個(gè)體素(1.5×10–3 mm 3),如圖所示10。對于轉(zhuǎn)色后(98 DAA,顯色性突出了漿果內(nèi)的空氣空間圖10A)和收獲后(154 DAA,,圖10B)漿果??諝饪臻g與轉(zhuǎn)色后漿果的花梗相連,但在收獲后漿果中不明顯。很明顯,室內(nèi)有更大的空氣空間。漿果近端區(qū)域和種子種臍之間的孔隙率、孔隙和通道在兩天采樣的漿果之間沒有差異(補(bǔ)充圖S3)。
圖10
X射線顯微CT確定的霞多麗漿果中的空氣空間。(A)在98 DAA(19.3°Brix)和(B)在154 DAA(24.5°Brix)在2015-2016季節(jié)。圖像已被處理以指示漿果輪廓。最小體素截止值為500。框輪廓上的白點(diǎn)間隔1毫米。
X射線顯微CT確定的霞多麗漿果中的空氣空間。(A)在98 DAA(19.3°Brix)和(B)在154 DAA(24.5°Brix)在2015-2016季節(jié)。圖像已被處理以指示漿果輪廓。最小體素截止值為500。框輪廓上的白點(diǎn)間隔1毫米。