研究簡(jiǎn)介:富營養(yǎng)化和藍(lán)藻水華主要是由過量營養(yǎng)物負(fù)荷引起的,尤其是磷(P)被認(rèn)為是限制浮游植物生長(zhǎng)的關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)。沉積物細(xì)菌可以通過聚磷酸鹽積累微生物和與Fe氧化還原相關(guān)的微生物影響P的通量,主要是通過多磷酸鹽積累微生物和Fe氧化還原相關(guān)微生物。微生物活動(dòng)可以增強(qiáng)沉積物中磷(P)的固定,但其背后的具體機(jī)制尚未完全明了。太湖是中國一個(gè)面臨富營養(yǎng)化問題的淡水湖,沉積物中的磷釋放是導(dǎo)致該問題持續(xù)存在的關(guān)鍵因素之一。鐵(Fe)和硫化物(S)的氧化還原形態(tài)被認(rèn)為通過微生物作用影響沉積物和水之間的磷轉(zhuǎn)移。在富營養(yǎng)化的淺水湖泊中,當(dāng)處于好氧環(huán)境時(shí),多磷酸鹽積累微生物會(huì)將多余的P儲(chǔ)存在其細(xì)胞中,當(dāng)環(huán)境變?yōu)閰捬鯐r(shí)會(huì)釋放P;這些過程通常在海洋和寡營養(yǎng)湖泊中起著關(guān)鍵作用。沉積物具有高度的異質(zhì)性,因此研究中對(duì)采集的沉積物樣本進(jìn)行了混合和篩選,以減少這種異質(zhì)性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。研究設(shè)計(jì)了三種處理?xiàng)l件(未處理、接種、滅菌)來研究微生物對(duì)沉積物中磷固定能力的影響。使用了高分辨率透析和DGT技術(shù)來獲取溶解態(tài)和活性態(tài)的鐵、磷和硫化物的分布情況,這些技術(shù)能夠提供對(duì)沉積物中氧化還原敏感成分的準(zhǔn)確測(cè)量。通過16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù),研究了不同處理?xiàng)l件下沉積物中細(xì)菌群落的豐度和組成。本研究主要探討在太湖梅梁灣的富營養(yǎng)化沉積物中,通過細(xì)菌氧化鐵或硫化物來增強(qiáng)磷保留的機(jī)制。


Unisense野外微電極研究系統(tǒng)的應(yīng)用


Unisense微電極被用來測(cè)量沉積物-水界面(SWI)處的溶解氧(DO)和氧化還原電位(Eh)。使用微電極(OX-100和RD-100,Unisense,丹麥)測(cè)量了SWI處的溶解氧(DO)和氧化還原狀態(tài)(Eh)。


實(shí)驗(yàn)結(jié)果


研究表明滅菌降低了沉積物固定P的能力,微生物對(duì)P的固定關(guān)鍵沉積物深度層為0-10毫米。此外滅菌完全抑制了細(xì)菌活性,并顯著降低了細(xì)菌群落的多樣性。滅菌或接種顯著改變了細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu),其中,綠彎菌門、變形菌門和擬桿菌門在非處理、接種和滅菌沉積物中最為主要。在這項(xiàng)研究中,微好氧或厭氧條件下的Fe氧化或硫氧化在細(xì)菌對(duì)沉積物中P的保留中起著重要作用。在接種滅菌后,細(xì)菌的保留P的能力顯著增強(qiáng),盡管沒有恢復(fù)到原來的水平。這意味著細(xì)菌群在接種后能夠快速建立起負(fù)反饋調(diào)節(jié)的能力,一旦本地沉積物細(xì)菌的功能和結(jié)構(gòu)受到嚴(yán)重破壞,盡管這需要進(jìn)一步在野外驗(yàn)證。

圖1、不同處理沉積物中DGT可溶性和溶解態(tài)磷/鐵的濃度,水體和沉積物界面處濃度的垂直分布(左),三個(gè)深度層的平均濃度(右;a、b和c表示在層內(nèi)不同處理之間的Duncan事后檢驗(yàn)結(jié)果,顯著性水平為0.05)。

圖2、沉積物芯的溶解氧(DO)和氧化還原電位(Eh)的垂直分布。

圖3、沉積物芯中DGT可溶性硫化物的二維濃度分布圖像。

圖4、掃描電子顯微鏡圖像(左),表面沉積物的CH4和CO2通量以及細(xì)菌群的Shannon多樣性(右)(Ntr:非處理沉積物芯;Ino:接種沉積物芯;Ste:滅菌沉積物芯)。

圖5、細(xì)菌群對(duì)沉積物中P保留的潛在機(jī)制(FeOB:Fe(II)氧化細(xì)菌;FeRB:Fe(III)還原細(xì)菌;SOB:硫化物氧化細(xì)菌;SRB:硫酸鹽還原細(xì)菌;紅色箭頭表示每個(gè)處理中P轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵過程;%表示關(guān)鍵細(xì)菌屬的相對(duì)豐度)。


結(jié)論與展望


微生物活動(dòng)可以增強(qiáng)沉積物中磷(P)的固定,但對(duì)其背后機(jī)制知之甚少。本研究從太湖中最富營養(yǎng)的梅梁灣取樣沉積物核,并在實(shí)驗(yàn)室孵育實(shí)驗(yàn)中設(shè)置了三種處理,包括(a)未處理的沉積物核,(b)接種,和(c)滅菌。采用高分辨率透析和薄膜中的擴(kuò)散梯度(DGT)技術(shù)分別獲取了溶解的和活性的鐵(Fe)和磷(P)。采用基于AgI的DGT技術(shù)測(cè)量了活性硫化物的二維分布。Unisense微電極被用來測(cè)量沉積物-水界面(SWI)處的溶解氧(DO)和氧化還原電位(Eh)。通過在不同深度使用微電極,研究者能夠評(píng)估沉積物中不同層次的氧化還原狀態(tài),這對(duì)于理解沉積物的垂直異質(zhì)性及其對(duì)磷循環(huán)的影響至關(guān)重要。采用掃描電子顯微鏡和16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)調(diào)查了細(xì)菌群落。結(jié)果顯示滅菌減少了沉積物固定磷的能力,并且微生物磷固定的關(guān)鍵沉積物深度層為0-10毫米。此外,滅菌或接種顯著改變了細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu)。在微好氧或厭氧條件下的Fe或S氧化在細(xì)菌保留沉積物中的磷中起著重要作用。在接種沉積物中的硝酸鹽還原偶聯(lián)Fe(II)氧化細(xì)菌(Acidovorax)和在未處理沉積物中的電生硫氧化細(xì)菌(Candidatus Electronema)被確定為負(fù)責(zé)沉積物中磷保留的關(guān)鍵細(xì)菌屬。