研究簡介:海洋浮游生物是海洋生態(tài)系統(tǒng)中的關(guān)鍵組成部分，它們通過光合作用和呼吸作用參與碳的循環(huán)。浮游生物的生產(chǎn)（P）和呼吸作用（R）之間的平衡對于理解海洋的碳預(yù)算至關(guān)重要。然而，對于這種平衡的準確測量存在困難，尤其是在不同尺度上，從微生物到生物地球化學(xué)的測量結(jié)果存在分歧，導(dǎo)致了對海洋營養(yǎng)狀態(tài)的爭議。早期的海洋生物學(xué)研究主要集中在光合作用上，而對呼吸作用的研究相對較少，部分原因是測量方法的局限性和對生產(chǎn)過程的重視。盡管隨著新的水生食物網(wǎng)范式的出現(xiàn)，呼吸作用開始受到更多關(guān)注，但其測量方法仍然是一個討論的焦點。最常用的方法是通過Winkler方法測量暗瓶和光瓶孵化后溶解氧的變化，但這種方法可能受到所謂的“瓶子效應(yīng)”的影響，即樣本與自然環(huán)境隔離可能帶來的偏差。

為了研究孵化時間和瓶子體積對浮游生物凈代謝測量的影響，在西北伊比利亞沿海系統(tǒng)進行了一系列時間序列實驗。實驗包括不同孵化時間（2至48小時）和不同瓶子體積（50、125和570毫升）的測量，以及使用氧氣微電極連續(xù)監(jiān)測氧濃度的變化。研究結(jié)果表明，24小時暗瓶孵化法在125毫升體積下并不存在系統(tǒng)性的偏差，并且氧氣微電極是研究自然海洋浮游生物呼吸動態(tài)的有效工具。這項研究反駁了之前關(guān)于暗瓶孵化可能存在偏差的觀點，并強調(diào)了在動態(tài)海洋生態(tài)系統(tǒng)中測量浮游生物呼吸率時需要考慮的尺度依賴性和方法學(xué)問題。強調(diào)了對海洋浮游生物呼吸作用更深入理解的重要性，這對于預(yù)測氣候變化對海洋生態(tài)系統(tǒng)的影響和制定相應(yīng)的環(huán)境政策具有重要意義。

Unisense微呼吸系統(tǒng)的應(yīng)用

Unisense微呼吸系統(tǒng)被用來連續(xù)監(jiān)測在實驗過程中溶解氧濃度的變化，以測定海洋浮游生物的暗社區(qū)呼吸率（DCR）。使用80毫升的硼硅酸鹽玻璃呼吸室，這些呼吸室被填充來自50升大瓶的海水。呼吸室的蓋子設(shè)計有一個毛細孔，允許氧氣微傳感器進入，同時孔的大小足夠小，以最小化樣品與水浴中的水之間的氧氣交換。在每次測量之前，使用兩點校準法對微電極進行校準。校準使用的是0%飽和溶解氧濃度（抗壞血酸和氫氧化鈉的溶液）和100%飽和溶解氧濃度（過濾并劇烈通氣的海水）作為校準點，校準在原位溫度下進行。將呼吸室放置在溫度控制的水浴中，并確保完全黑暗。由于傳感器對溫度變化非常敏感，水浴設(shè)定的溫度比原位溫度高0.2°C，以避免孵化開始時可能的急劇溫度下降。在樣品穩(wěn)定之后（60-90秒），將微電極插入呼吸室蓋子的毛細孔中，開始測量。每20秒記錄一次溶解氧濃度，連續(xù)監(jiān)測48小時。通過計算溶解氧濃度隨時間下降的斜率來確定氧氣消耗率。

實驗結(jié)果

研究結(jié)果表明24小時的暗瓶孵化實驗在125毫升的樣本量下，并沒有顯示出系統(tǒng)性的偏差，無論是由于樣本大小、所謂的“瓶子效應(yīng)”還是氧氣消耗率的非線性變化。通過將Unisense微電級系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測的數(shù)據(jù)與Winkler方法得到的離散數(shù)據(jù)進行比較，研究發(fā)現(xiàn)兩種方法在測量海洋浮游生物的暗社區(qū)呼吸率（DCR）方面是一致的，且微電級系統(tǒng)的數(shù)據(jù)在統(tǒng)計上與Winkler方法的數(shù)據(jù)沒有顯著差異。大多數(shù)情況下，從最小孵化時間到24小時，實驗觀察到的氧氣消耗保持線性，這支持了之前研究中關(guān)于較長孵化時間內(nèi)氧氣消耗率恒定的發(fā)現(xiàn)。強調(diào)了浮游生物群落結(jié)構(gòu)和呼吸率變化之間的復(fù)雜關(guān)系，并表明呼吸率的變化更多地受到生態(tài)因素的影響，而不是群體的遺傳組成。

圖1、里亞德維戈地圖上的采樣點位置。

圖2.不同時間序列實驗中的葉綠素a濃度和細菌豐度。

圖3、不同時間序列實驗中最常見的微型浮游生物群落的貢獻。

圖4、每個瓶子體積內(nèi)的累積呼吸量以及不同孵化周期。

圖5.使用氧氣微電極測量的暗孵化期間（TS3n-TS5n）的連續(xù)氧減少。

結(jié)論與展望

海洋中浮游生物的生產(chǎn)與呼吸平衡的準確測定對于碳預(yù)算和全球變化預(yù)測非常重要。由于在不同尺度上測量這種平衡存在分歧，導(dǎo)致了對海洋營養(yǎng)狀態(tài)的爭議。尤其是在寡營養(yǎng)的開放海域中，24小時的孵化實驗經(jīng)常顯示出凈異養(yǎng)平衡，但類似的困難也出現(xiàn)在沿海系統(tǒng)中。這些結(jié)果因為可能存在的長期孵化時間和所謂的“瓶子效應(yīng)”而受到批評。為了研究孵化時間和瓶子體積對浮游生物凈代謝測量的影響，在西北伊比利亞沿海系統(tǒng)進行了一系列時間序列實驗。通過標準體外溶解氧濃度變化和(2)氧氣微傳感器每20秒測量一次的氧濃度下降，同時獲得了浮游生物群落呼吸率的測量結(jié)果。本研究結(jié)果反駁了24小時暗瓶孵化在125毫升體積下系統(tǒng)性偏見的說法，并強調(diào)了氧氣微傳感器在研究自然海洋浮游生物呼吸動態(tài)方面的有效性。本研究結(jié)果對支持使用unisense氧氣微呼吸系統(tǒng)作為測量沿海海洋生態(tài)系統(tǒng)中浮游生物DCR的準確工具，并表明它們是評估呼吸率線性的可行選項。對于改進海洋生態(tài)系統(tǒng)中浮游生物呼吸作用的測量方法和理解其在全球碳循環(huán)中的作用具有重要意義。